Léčba chronických herpes infekční vakcíny na bázi dendritických buněk, IFN-indukované

Jedním z důležitých problémů moderní infektologie je chronické recidivující formu herpetické infekce virem herpes simplex typu 1 a 2. Frekvence recidiv závisí i údaje, jako je kvalita pacientova života. Nicméně, míra recidivy 6 a vícekrát do roka, se všemi zdánlivě „neškodný“ infekcí mít významný dopad na celkový zdravotní stav pacienta. Podle regionální kanceláře WHO pro Evropu je definováno herpes infekce u skupiny nemocí, které určují budoucí infekčních chorob v tomto století.

Jak je známo, jsou projevy chronické herpetické infekce jsou velmi specifické a jsou projevuje jedno nebo skupinových bublina prvky s serózní obsah uvnitř (váčky), které se objeví v pozadí „prodrome“ - svědění a nepohodlí v místě budoucích bublin. Vyrážka má dynamický vývoj: vzdělání v dynamice na zem krusty bubliny a následné hyperpigmentace. Frekvence exacerbací chronické infekce závisí na formě onemocnění a kvalitu pacientova života. Na jedné exacerbace trvá v průměru 1-2 týdnů obnovy, v tomto pořadí, pracovní kapacita je v této době poněkud omezené. Často recidivující forma infekce je zaznamenána při frekvenci exacerbací nejméně 4, 6-krát za rok, a to i v případě prominutí období posledních přibližně 2,5 měsíce. Ve výrazném oslabení imunitního systému, někteří pacienti si stěžují na frekvenci exacerbací až 15-20 krát ročně. Samozřejmě, že by takoví pacienti měli být individuální a dlouhodobé léčby schéma s nejnovější techniky.

Projevy herpes simplex

Vyvinuté režimy zahrnují antivirové herpetických infekcí (acyklovir, valaciklovir, famciklovir, a další) a imunomodulační (interferony, induktory endogenního interferonu Immunopreparat jiných skupin), terapie, která účinně v určité fázi onemocnění. Nejvíce léčebné režimy zaměřen na poklesy akutní nemoci, ale neklade za cíl dlouhodobý efekt. Taková léčba není vždy dostatečná, aby se dosáhlo požadovaného výsledku - snížení recidivy na minimum. Definování problému je vývoj rezistence (stability) viry na antivirové léky, zejména použitý nekontrolovatelně a bez lékařského předpisu. V tomto ohledu je výzkum a vývoj ještě dál. Vyvinout léky a vakcíny schéma terapie chronické infekce herpes. Ale tyto metody ukázala nedostatečnou maximální aktivitu. To přišlo na přelomu nejnovější vědecký základ léčby pomocí specifických dendritických buněk.

dendritické buňky (Dendrocytech nebo DC) se vztahují na buňky imunitního systému, a představují zvláštní druh leukocytů s rozvětvenou strukturou (dendron-strom, řecké.). Dendritické buňky mají poměrně velký rozměr - až 15-20 ma jsou umístěny téměř ve všech orgánech a tkáních. Dendritické buňky hrají důležitou roli v imunitním systému - funkce antigen prezentující. Jinými slovy, v kontaktu s mikroorganismem (viry, bakterie, houby, atd.) V našem těle Dendritické buňky absorbuje pomocí fagocytózy procesu, a pak ji použít antigeny pro „pohledů“ specifických imunokompetentních buněk k produkci protilátky (antigen-specifickou imunitní odpověď). Dendritické buňky jsou schopné aktivovat vysokým výkonem imunokompetentní buňky, jako jsou CD4 T-lymfocytů iCD8. Nicméně, mnoho vědecké studie prokázaly významnou redukci dendritických buněk u pacientů s chronickou virovou chorobou, která je považována za jednu z příčin dlouhodobé přetrvávání virů v lidském těle.

dendrocytech

Jednou z moderních metod léčby chronické recidivující formy herpes infekce je založen na prezentaci antigenu dendritickými buňkami herpes viru v přítomnosti interferonu-alfa a ostatních složek [ „Způsob chronické imunoterapii často recidivující herpesvirus infekce“ patentu RU 2485962 založený FGBI "Výzkumný ústav klinické imunologie "Sibiřský pobočka Ruské akademie lékařských věd (FGBU "NIIKI" CO RAMS) Ostanin AA, Starostin N. M., Černá ER].

Cílem této metody je poskytnout dendritických generace mobilní nových vakcín, které jsou schopny vyřešit jediný problém - snížení klinických projevů herpes infekce a snížení četnosti relapsů na minimum použitím nákladově efektivní způsob imunoterapie chronické recidivující herpes infekce. K dosažení tohoto cíle je dosaženo vytvořením z monocytů v periferní krvi pacienta autologní interferonu-a indukovaného dendritickými buňkami naloženo rekombinantním antigenem viru herpes simplex v kultivačním InVitro, že pacient dostane 2mya kurzy ve spojení s přípravou rekombinantního interleukinu-2 jako pomocné látky (léčiva zvyšující imunitní odpověď). To je vzhledem k IL-2, je aktivace T-buněk, je zabráněno apoptóza (buněčná smrt) lymfocyty, syntéza s dlouhým poločasem cytotoxických T lymfocytů.

Očekávaný výsledek léčby je vývoj celé antigen-specifické imunitní odpovědi na vysoké úrovni po delší dobu.

Indikace pro léčbu

DK-indikace pro vakcinaci je chronické herpes infekce, často recidivující formu při relapsů o více než 6 krát za rok, a od posledního opakování intervalu alespoň 2 týdnů (tj, v remisi).

Jak je léčba dendritických buněk

Technické provádění této metody je takto: Pacient je hospitalizován v nemocnici, kde se konala generace dendrokletok z periferní krve pacienta. Ráno se vyjme 200 ml krve do lahvičky s heparinem (1000 U), do které se přidá zhelatinol roztok (40 ml) a inkubuje se při teplotě 370 po dobu 45 minut. Tvořil leukocytů suspenze, která byla centrifugována po dobu 20 minut při 1000 ot / min. Vysrážené buňky byly promyty fosfátem zabufernym fyziologického roztoku (PBS), navrstvena na hustotním gradientu Ficoll-verografin a opět se odstřeďuje po dobu 20 minut, avšak při 3000 ot / min. Shromážděné mononukleární buňky (MNC) se dále zpracovává (dvakrát promyty, resuspendovány) uvolnit MNC v koncentraci 3 x 106 / ml a byla provedena inkubace při teplotě 370 po dobu 2 hodin (to nezrelyedendrokletki). Následně byly buňky znovu testovány další zpracování zatížení interferon-a 1000 U / ml (Roferon-A, Roche, Shvetsarii), re-kultivaci po dobu 3 hodin. Poté, v přítomnosti léku polioksidony (NO PetrovaksFarm, Rusko) v dávce 2 ng / ml, a tam je konečné zrání dendritických buněk.

Generace stejnosměrných buněk

Tímto způsobem a získá IFN-DC (interferonem indukovaný dendritické buňky), které jsou následně načten specifické rekombinantní (uměle sídlem v laboratoři) antigen z viru herpes simplex (HSV 1 gD, NPO „diagnostický systém“ Dolní Novgorod) v dávce 5 ug / ml inkubací po dobu 1 hodiny při 370.

Výsledný přípravek (specifické IFN-DK) v koncentraci 6,0 x 106 / ml Cryopreserve pro pozdější použití. Celý výrobní proces trvá 4 dny.

Technika DC očkování

Technika DC očkování užívání tohoto léku se skládá ze 2 předmětů vakcíny:

1) „induktor kurz“ 4-6, zahrnuje podkožní injekce v horní třetině osazením v dávce 5,0 x 106 / ml v intervalech 2 týdnů. Očkování se provádí na pozadí současným podáváním interleukinu-2 - příprava „Ronkoleykin®“ (OOO „Biotech“, St. Petersburg, Rusko) v dávce 0,25 mg, která se podává subkutánně jako adjuvans.

injekce

2) „Podpora průběh“ se skládá z 3-6 subkutánními injekcemi IFN-DC v dávce 5 * 106 ml 1 v intervalech jednou měsíčně současně s adjuvans.

Sledování účinnosti DC očkování se provádí stanovením hladiny proliferativní odpověď na stimulaci MNC vakcinační antigen z viru herpes (HSV 1GD) a mitogenem (Con A). Pacient se vyjme 10 ml žilní krve, který je zpracován a po dobu 72 hodin k posouzení úrovně proliferace a dalších složek studie. Výsledky uvedeny jako průměr účtu (imp / min) ze tří identických kultur. Řízení se provádí 4 krát: před zahájením léčby, po 1 roce po 2. roce a 6 měsíců po ukončení léčby (novější studie 15 měsíců po zahájení léčby).

léčba Prgnoz

Při použití této metody, DC-očkování vakcínou IFN-DCS vykazují účinnost 75% nemocných chlorovodíkové se často recidivující formou herpes infekce. To znamená, že frekvence relapsů u pacientů se snížila o 3 krát, a byla snížena a celková plocha lézí v trvání exacerbace remise (interrecurrent období) je prodloužena až do 3 měsíců nebo déle. Také poznamenat, zlepšení v antigen-specifické imunitní odpovědi, indukované po druhé vakcinaci, nebo 6 měsíců po ukončení léčby.

Proto můžeme hovořit o nové účinné metody DC-vakcíny, který je schopen stimulovat produkci imunitní odpovědi antigen-specifické nejen v období vakcíny, ale po 6 měsíců po ukončení léčby, což nepochybně vliv na míru relapsu pro danou nemoc a kvalitu života pacientů často chronické recidivující herpetické infekce.